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摘要：將５種致瀉大腸埃希氏菌的毒力基因保守序列進 行設(shè)計并合成了引物和探針，建立的多重實時熒光PCR4種試劑盒可以同時檢測５種致瀉大腸埃希氏菌。結(jié)果表明：4種試劑盒的12對毒力基因通過５種 致 瀉 大 腸 埃 希氏菌的標(biāo)準(zhǔn)儲備菌株均得到驗證；并且12對毒力基因只對對應(yīng)的致瀉大腸埃希氏菌特異性起作用，對常見的食 源性致病菌都無擴增曲線；escV、bfpB、stx1、ipaH和invE基因的檢出限是10CFU／mL,aggR 基因的檢出限是102CFU／mL,astA和pic基因的檢出限是103CFU／mL,而stx2A、ipaH和stIb基因菌液濃度＜10CFU／mL時， 均可觀察到明顯的“Ｓ”型擴增曲線，且線形較好；并且對抽查和委托檢驗的肉 類、奶和動物腹瀉物以及人工污染 樣品等 40份樣品進行檢測，共檢出11份陽性樣本，與GB4789.6—2016標(biāo)準(zhǔn)檢測結(jié)果相一致，表明建立的４種 試劑盒方法具有良好的實用性。?

關(guān)鍵詞：致瀉大腸埃希氏菌；實時熒光定量PCR；毒力基因